Progressos no Trabalho

Como já havíamos comunicado, no dia 18 de Março participámos no VI Congresso dos Jovens Geocientistas que se realizou na Universidade de Coimbra. Foi um dia bastante agradável e tivemos a oportunidade de ver os nossos colegas a apresentar os seus trabalhos.

No início de Abril, enviámos o nosso trabalho para o 19º Concurso dos Jovens Cientistas e Investigadores e, na semana passada, recebemos a notícia de que fomos seleccionadas para a Mostra de Ciência a realizar entre 26 e 28 de Maio de 2011.

Parâmetros Microbiológicos – Leituras e Testes

I - Coliformes Totais

• Meio de Cultura: Chromocult.
• Método: M. F.
• Preparação: Distribuir o meio de cultura por placas de 6 mm de diâmetro (aproximadamente 6 ml por placa).
• Observações: Preparar 3 réplicas e uma placa em branco.
• Incubação: A 37ºC durante 24 horas.
• Leitura: Contar colónias de cor vermelha e salmão. As colónias de cor azul-escuro e violeta são Escherichia coli. Outros Gram negativos surgem incolores ou com cor desde o azul claro a turquesa.

II – Coliformes fecais

• Meio de Cultura: M-FC-Agar.
• Método: M. F.
• Preparação: Distribuir o meio de cultura por placas de 6 mm de diâmetro (aproximadamente 6 ml por placa).
• Observações: Preparar 3 réplicas e uma placa em branco.
• Incubação: A 44ºC durante 24 horas.
• Leitura: Contar as colónias de cor azul. Ignorar as colónias de branca e bege.

III – Estreptococos fecais

• Meio de Cultura: Slanetz and Bartley.
• Método: M. F.
• Preparação: Distribuir o meio de cultura por placas de 6 mm de diâmetro (aproximadamente 6 ml por placa).
• Observações: Preparar 3 réplicas e uma placa em branco.
• Incubação: A 37ºC durante 48 horas.
• Leitura: Contar as colónias rosa e acastanhadas de diâmetro compreendido entre 0,5 a 2 mm.

Preparação de Meios de Cultura

Material:
Material de vidro:

• Proveta de 250 mL
• 3 vidros de relógio
• 3 varetas de vidro
• 3 erlenmeyers de 250 mL com rolha de algodão

Material diverso:

• Algodão cardado
• Gaze
• 3 espátulas
• 3 Meios de cultura desidratados (comercial)
• 5 mL de NaOH 1N
• 5 mL de HCl 1N
• 2 lamparinas de álcool
• Algodão hidrófilo
• Álcool etílico a 96 %
• Marcador de acetato
• Fósforos
• Balança de precisão
• Medidor de pH
• Placa de aquecimento
• Recipiente para promover o banho-maria (ex: cafeteira)
• Folha de alumínio

Execução:

1. Pesar a quantidade de Meio de Cultura desidratado correspondente a 250 mL de meio e transferir para um erlenmeyer de 250 mL.
2. Perfazer com água destilada até 250 mL.
3. Agitar com uma vareta de vidro até dissolver completamente.
4. Ajustar o pH de acordo com as indicações da embalagem.
5. Tapar o erlenmeyer com a rolha de algodão e colocar em banho de água a 100º C para cozer o meio, agitando regularmente e de acordo com as indicações da embalagem.
6. Retirar o erlenmeyer do banho de água, deixar arrefecer à temperatura ambiente e guardar no frigorífico a 4ºC.

I – Chromocult – Coliformes Totais

1. Dissolver 6,625 g em 250 mL de água destilada, em banho-maria, agitando regularmente até o meio de cultura se tenha dissolvido completamente.
2. Acertar o pH: 6,8 ± 0,2 a 25ºC.
3. Levar à ebulição.
4. Deixar arrefecer à temperatura de 50ºC.
5. Verter em placa de Petri, aproximadamente 6 mL.

II – M-FC-Agar – Coliformes fecais 

1. Preparar uma solução de 0,8 g de NaOH 0,2 N em 10 mL de água e adicionar-lhe 0,1 g de ácido rosólico.
2. Dissolver 13 g em 250 mL de água destilada, aquecendo em banho-maria, agitando regularmente até que o meio de cultura se tenha dissolvido por completo.
3. Acertar o pH: 7,0 ± 0,2 a 25ºC.
4. Aquecer em banho-maria durante 20 minutos.
5. Nos últimos 2 minutos, misturar com a solução preparada anteriormente.
6. Deixar arrefecer à temperatura de 50ºC.
7. Verter em placas de Petri, aproximadamente 6 mL.

III – Slanetz and Bartley – Estreptococus fecais

1. Dissolver 10,375 g em 250 mL de água destilada, em banho-maria, agitando regularmente até que o meio de cultura se tenha dissolvido completamente.
2. Acertar o pH: 7,2 ± 0,2 a 25ºC.
3. Levar à ebulição durante 20 minutos.
4. Deixar arrefecer à temperatura de 50ºC.
5. Verter em placas de Petri, aproximadamente 6 mL.

NOTA: Todo o material sujo deve ser colocado em tabuleiro próprio para recolher à sala de lavagem e esterilização.

Determinação do manganês para a gama de 0,1 – 4,0 mg/l

Determinação do manganês para a gama de 0,1 – 4,0 mg/l
Nº 914218 (VISOCOLOR)

Procedimento:

1. Lavar repetidamente a cuvete com a amostra e adicionar até perfazer a marca (9 mL).
2. Adicionar 5 gotas de manganês – 1e agitar.
3. Adicionar 5 gotas de manganês – 2 e agitar.
4. Aguardar 1 minuto.
5. Adicionar 5 gotas de manganês – 3 e agitar.
6. Aguardar 5 minutos.
7. Limpar cuidadosamente a cuvete e introduzi-la no fotómetro.
8. Proceder à leitura no fotómetro segundo as regras de utilização.
9. Seleccionar o filtro 3.
10. Seleccionar o parâmetro V MANGANESE.

Determinação do sulfato para a gama de 20 – 200 mg/L

Determinação do sulfato para a gama de 20 – 200 mg/L

Nº 914235 (VISOCOLOR)

Procedimento:
Lavar repetidamente a cuvete com a amostra e adicionar até perfazer a marcar (9 mL).
Adicionar 10 gotas de Sulfato-1 e dissolver agitando suavemente.
Adicionar 1 colher (grande) de Sulfato-2 e dissolvê-la agitando (a amostra fica mais ou menos turva).
Aguardar 1 minuto.
Limpar cuidadosamente a cuvete e introduzi-la no fotómetro.
Proceder à leitura no fotómetro segunda as regras de utilização.
Seleccionar o filtro 2.
Seleccionar o parâmetro V SULPHATE.

Precauções de Segurança:
O Sulfato-2 contém cloreto de bário, sendo nocivo por inalação e ingestão.
Em caso de acidente, avisar imediatamente o médico.

Determinação do ferro para a gama de 0,1-7 mg/L Fe

 Determinação do ferro para a gama de 0,1-7 mg/L Fe
(Fe^2+ e Fe^3+)

Procedimento:

1. Lavar repetidamente a cuvete com a amostra e adicionar até perfazer a marca (9 mL).
2. Adicionar 5 gotas de Ferro – 1. Fechar e agitar.
3. Adicionar 1 colher de Ferro – 2. Fechar e agitar.
4. Adicionar 5 gotas de Ferro – 3. Fechar e agitar.
5. Adicionar 5 gotas de Ferro – 4. Fechar e agitar.
6. Aguardar 5 minutos.
7. Limpar cuidadosamente a cuvete e introduzi-la no fotómetro.
8. Proceder à leitura no fotómetro segundo as regras de utilização.
9. Seleccionar o filtro 3.
10. Seleccionar o parâmetro V IRON DEV.

NOTA: para determinar Fe^2+, o procedimento a seguir é o anterior eliminando o 3º passo, isto é, não adicionar o reagente 2.

Determinação do nitrito para a gama de 0,02 – 0,50 mg/L NO2

Determinação do nitrito para a gama de 0,02 – 0,50 mg/L NO2
VISOCOLOR ECO

Procedimento:

1. Lavar repetidamente a cuvete com a amostra e adicionar 5 mL da amostra.
2. Adicionar 4 gotas do Nitrito-1. Agitar.
3. Adicionar 1 colher Nitrito-2 e agitar até à dissolução completa
4. Aguardar 10 minutos.
5. Limpar cuidadosamente a cuvete e introduzi-la no fotómetro.
6. Proceder à leitura no fotómetro segundo as regras de utilização
7. Seleccionar o filtro 4.
8. Seleccionar o parâmetro ECO NITRITE- (0,02 – 0,50 mg/L) NO2.